Snadno použitelný prefabrikovaný DNA pufr: Žádné zmatky kolem ředění, žádné chlazení, jen 5minutové gely

Co je snadno použitelný prefabrikovaný DNA buffer? Je to technologie DNA bufferu, která vám umožní ušetřit co nejvíce času a nezpůsobit další problémy vaší únavné pracovní zátěži. Mnoho komerčních "rychlých" bufferů slibuje rychlé oddělení, ale přináší své vlastní výzvy: složité kroky ředění, povinné chlazené skladování a spornou kompatibilitu s následnými aplikacemi.

Longlight Technology navrhla 50x super rychle běžící vyrovnávací paměť Aby se těmto nástrahám vyhnuli. Výsledkem je nízko-iontový agarózový pufr, který zkracuje typické 30minutové běhy na 5–10 minut, aniž by vyžadoval speciální manipulaci nebo složité přípravy.

Níže je jasný rozpis, co dělá tento snadno použitelný prefabrikovaný DNA pufr skutečně praktickým pro každodenní laboratorní práci.

Technický základ: nízká iontová pevnost, méně tepla

Standardní 1X TAE a TBE buffery mají relativně vysokou iontovou pevnost. Když napětí stoupá, Jouleovo zahřívání prudce stoupá, což vede k rozmazání pásu, deformaci vrtu a nekonzistentní migraci. Snadno použitelný prefabrikovaný DNA buffer by měl umožnit vyšší napětí bez těchto vedlejších účinků. Nízkomolární vodivé média nabízejí osvědčené řešení.

Výzkumníci včetně Jonathana R. Brodyho, Erica S. Calhouna, Eike Gallmeiera, Talisy D. Creavalle a Scotta E. Kerna z Lékařské fakulty Johns Hopkins University prokázali, že snížení koncentrace iontů účinně snižuje tvorbu tepla. Jejich práce ukázala, že média s nízkou molaritou "snižují Jouleovo zahřívání elektroforetického systému a umožňují snadné a ultrarychlé oddělení fragmentů DNA."

Dřívější zjištění Singhala, Rena a Kerna z Johns Hopkins (2010) potvrdila, že podmínky nižší vodivosti vedou k rychlejším běhovým rychlostem a ostřejšímu oddělení pásů u fragmentů od 100 bp do 12 kb v jednom gelu.

Zlepšená DNA elektroforéza v

Podmínky příznivé polyborátům a Lewisově kyselinové komplexaci | PLOS One

Longlight Technology aplikovala tento princip přímo na 50X Super Fast Running Buffer. Díky nízkému zatížení iontové zátěže umožňuje buffer napětí až 30 V/cm při zachování rozlišení. To je základní inženýrství za skutečně snadno použitelným prefabrikovaným DNA bufferem, který poskytuje rychlost bez kompromisů.

Proč tento buffer snižuje každodenní tření v laboratoři

Praktický snadno použitelný prefabrikovaný DNA buffer by měl zjednodušit tři běžné problémy: chyby ředění, logistiku ukládání a přerušení pracovního postupu. Takto 50X Super Fast Running Buffer řeší každý z nich.

• Bez záměny ředění: Zřeďte koncentrát 50X v poměru 1:50 destilovanou vodou, abyste získali pracovní roztok 1X. Žádné úpravy pH, žádné další výpočty. Použijte stejný 1X buffer pro gelové odlévání a rozběh, abyste udrželi konzistentní iontovou sílu.

• Není potřeba chlazení: Jak 50X vývar, tak zředěný pufr 1X zůstávají stabilní při pokojové teplotě alespoň 12 měsíců. Laboratoře mohou na stole skladovat pufry, čímž uvolňují chladný prostor pro enzymy a protilátky.

•Žádné čekání na gely: Nízkoteplotní konstrukce podporuje 25–30 V/cm. Oddělení, které obvykle trvá 30 minut, končí za 5–10 minut. To zvyšuje propustnost laboratoří, které denně zpracovávají mnoho vzorků.

• Není potřeba žádná separace: tento pufr poskytuje možnosti extrakce gelu a ligace. Uživatelé mohou dokonce provádět sekvenování nebo klonování ihned po přeřezání pásma a uvolnění bufferu.

•Celková znovupoužitelnost: Skvělá kapacita bufferu se po použití při dvaceti jednach nezmění. Šetří to více peněz a snižuje množství odpadu vznikajícího při používání rezervy.

Proč laboratoře přecházejí na rychlejší a jednodušší vyrovnávací se s trhem

Trh s elektroforézou by měl do roku 2033 vzrůst na 4,47 miliardy USD z 2,72 miliardy USD do roku 2024. To odpovídá CAGR 5,7 %. Tento růst je poháněn rostoucím výzkumem genomiky, molekulární diagnostikou a vysokokapacitním screeningem. Snadno použitelný prefabrikovaný DNA buffer přímo zapadá do tohoto trendu: laboratoře potřebují rychlejší dobu zpracování, ale také metody, které se bezproblémově integrují do stávajících pracovních postupů.

Prefabrikované agarózové gely si již získaly široké rozšíření, protože nabízejí konzistentní kvalitu a šetří čas odlití. Nicméně běžící buffer zůstává kritickou proměnnou. Buffer, který vyžaduje chlazené skladování, složité ředění nebo speciální manipulaci, zpomaluje celý proces. 50X Super Fast Running Buffer udržuje věci jednoduché a zároveň drží krok s moderními požadavky laboratoře. Vyvážení rychlosti a použitelnosti umožnilo společnosti Longlight Technology vyvíjet své produkty.

Příklady betonových laboratoří

Praktické využití snadno použitelného prefabrikovaného DNA bufferu, kde lze dosáhnout významné úspory času, zahrnují:

•Ověření PCR produktů: Rychle spusťte potvrzovací gely na PCR produktech během 5–10 minut, zkontrolujte výsledky a rozhodněte o dalších krocích pro sekvenování nebo následné aplikace.

• CRISPR nebo zpětná vazba z experimentu digest: Rychle vyhodnocujte výsledky, jako je efektivita úprav nebo digestu, a provádějte úpravy pro experimenty ve stejný den.

•Kontrola kvality knihovny NGS: Kontrola kvality knihovny NGS může pomoci předejít nebo minimalizovat selhání sekvenování při běhu NGS.

•Syntetická biologie: Uzavřít návrhový cyklus syntézou konstrukcí, úpravou pro ověření sekvence a odpovídajícím úpravami bez ztráty času mezi jednotlivými cykly.

• Testování cílů na drogy: Vyhněte se ztrátě čistoty pásu během experimentů s vysokou propustností tím, že zvýšíte efektivitu screeningu na velkých vzorkových sadách.

Snadné použití

Používání 50X Super Fast Running Buffer lze provádět krok za krokem bez nutnosti výuky předmětů.

Krok 1 – Připravte 1X buffer: Přidejte 20 ml koncentrátu 50X na 980 ml destilované vody a promíchejte. Pufr 1X lze skladovat při pokojové teplotě.

Krok 2 – Odlití a spouštění gelů: Použijte stejný 1X pufr pro agarózu a elektroforézu. Používejte délku agarózových gelů v rozmezí 25-30 V/cm. Gel nevyžaduje žádné úpravy metod barvení.

Krok 3 – Vidět gel a učinit rozhodnutí: DNA barvení lze přidat během procesu odlévání gelu nebo gel může být namočen do barvy po elektroforéze. Pásma jsou jasně viditelná a mohou být vynechána pro následné procesy.

Shrnutí

Snadno použitelný Prefabrikovaný DNA buffer by měl být přesně to: snadno ředitelný, snadno skladovatelný a snadno integrovatelný do stávajících pracovních postupů. 50X Super Fast Running Buffer od Longlight Technology dosahuje všech tří funkcí. Zkracuje dobu provozu z 30 minut na 5–10 minut tím, že minimalizuje tvorbu tepla, ale nevyžaduje chlazení, složitou manipulaci ani další kroky čištění. Pro laboratoře, které oceňují rychlost i spolehlivost, tento buffer nabízí přímočaré vylepšení.

Pro více informací, pro žádost o cenovou nabídku nebo zadání objednávky navštivte www.longlight.com nebo kontaktujte přímo tým Longlight Technology.

Často kladené otázky

Otázka: Je 50X Super Fast Running Buffer opravdu snadno použitelný prefabrikovaný DNA buffer?

Odpověď: Rozhodně. Neexistují žádné složité výpočty ředění ani úpravy pH. Také není potřeba chladit. Stačí zředět 50X v destilované vodě 1:50, nechat to stát na RT a je to připraveno na 5minutové gelové běhy!

Otázka: Je tento buffer znovupoužitelný?

Odpověď: Rozhodně! Díky silné kapacitě bufferu lze stejný pracovní roztok 1X použít vícekrát, což snižuje jak odpad, tak náklady na experiment!

Otázka: Váš pufr tvrdí, že je kompatibilní s různými elektroforézními a barvicími systémy. Je to opravdu tak?

Odpověď: Ano! Tento buffer můžete použít jako 1X jak pro gel, tak pro jeho spuštění. Gel můžete nalít s DNA barvou a namočit ho po E kvůli barvení. Můžete si svůj design přizpůsobit podle libosti!

Otázka: Škodí snadno použitelný prefabrikovaný DNA pufr ligaci nebo extrakci gelu?

Odpověď: Rozhodně ne! Můžete vyříznout požadované pásy a provést sekvenci bez dalšího čištění!

Otázka: Může tato rezerva zůstat na RT 12 měsíců?

Odpověď: Ano. Oba typy 50X i 1X připravené jsou stabilní na RT po dobu 12 měsíců. Nemusíte se bát, že by byl buffer studený!